醫療器械的安全性評價是注冊過程中的核心環節，而細胞毒性試驗作為生物學評價的基本項目，直接關系到產品與人體接觸時的生物相容性。理解并正確選擇細胞毒性評價方法——是采用定量評價還是定性評價，對于獲取可靠、客觀的數據至關重要。這兩種方法各有特點，適用場景也不同。本文將詳細說明這兩種評價方法的核心差異以及在實際應用中的選擇原則，幫助大家更清晰地把握評價方向。

第一步：認識細胞毒性評價的兩種主要方法

細胞毒性評價的目的是檢測醫療器械或其浸提液是否會對細胞產生毒性作用。目前主要采用兩種評價方式：定量評價和定性評價。定量評價側重于通過可測量的數值指標來客觀反映細胞狀態的變化，例如精確測定細胞的數量增減、細胞內蛋白質的總量變化、細胞受損后特定酶的釋放量、活體染料被細胞攝入或釋放的情況，或者活體染料被活細胞還原的程度等。定性評價則主要依賴評價人員在顯微鏡下觀察細胞形態的改變，例如細胞整體形狀是否正常、細胞內是否出現異常空泡、細胞是否從生長表面大量脫落、細胞是否發生溶解破裂、細胞膜的完整性是否遭到破壞等，并對這些變化進行描述或分級評分。

第二步：理解定量評價的特點與優勢

定量評價方法的最大特點是其客觀性和可量化性。因為它測量的是具體的物理或化學參數，數值結果直接來源于儀器檢測，很大程度上減少了評價人員主觀判斷的影響。這種方法通常具有較高的靈敏度，能夠檢測到細微的毒性效應。更重要的是，定量評價會設定明確的判定限值或閾值，結果判定標準清晰。例如，通過測定光密度值（OD值）來計算細胞存活率，低于某個預設百分比（如70%）即可判定存在細胞毒性。目前，在國內醫療器械檢測領域，MTT定量法是一種應用非常普遍的定量評價方法。它的原理是利用活細胞線粒體中的酶可以將黃色的MTT染料還原成藍紫色的結晶，結晶的量與活細胞的數量和活性成正比，通過溶解結晶并測定其吸光度，就能定量計算出活細胞的比例，從而評估材料的細胞毒性。

第三步：理解定性評價的特點與適用場景

定性評價方法的核心在于對細胞形態變化的顯微觀察和主觀判斷。評價人員需要根據經驗，識別細胞在接觸受試樣品后出現的各種異常形態特征，并依據標準（如GB/T 16886.5中的表格）對這些變化進行描述或給出0-3級的毒性評分。這種方法不可避免地帶有評價者的主觀性，不同人員觀察同一份樣本可能會產生細微差異。由于定性評價主要基于形態學變化，操作相對快捷，更適合用于大量樣品的初步篩選工作。當需要快速判斷一批材料或產品是否存在潛在毒性風險時，定性評價可以作為第一步的篩選手段。它也能提供一些定量方法難以捕捉的形態學信息。

第四步：掌握選擇評價方法的核心原則

明確了兩種方法的特點，選擇原則就變得清晰。國內相關的強制性國家標準GB/T 16886.5《醫療器械生物學評價 第5部分：體外細胞毒性試驗》明確指出：“細胞毒性的定量評價更好一些，定性方法適合篩選用途”。這為我們的選擇提供了明確的法規依據。實際測試中，推薦將定量評價作為基礎性的、主要的評價方法。因為定量評價能提供客觀、可重復、有明確判定標準的數值結果，是證明產品安全性的有力證據。在進行定量評價（如MTT法）的同時，通常需要結合顯微鏡檢查細胞形態（定性觀察），并將形態學觀察結果在報告中描述。定性評價主要是在有特定需求時作為補充手段使用，例如在研發初期進行大量配方或材料的快速毒性篩查。

第五步：實際應用中的操作要點

在實際操作中，選擇定量評價法（如MTT法）作為標準測試方法。嚴格按照標準（如GB/T 16886.5）和實驗室操作規程進行樣品制備（浸提）、細胞培養、加樣、孵育、測定（如MTT染色、溶解、測OD值）等步驟，確保結果的準確性和重現性。無論采用哪種方法，都應設置合理的陰性對照（如高密度聚乙烯或超高分子量聚乙烯）和陽性對照（如含有機錫的PVC或苯酚稀釋液），以確保試驗系統的有效性和敏感性。在實驗報告中，必須清晰說明所采用的評價方法是定量還是定性，詳細描述實驗過程（包括浸提條件、細胞系、培養時間、評價方法原理等），并依據標準要求報告具體結果（定量數據如細胞存活率百分比、定性描述或毒性分級）。對于定量評價結果，依據標準或內部經過驗證的判定標準（如細胞存活率低于70%提示潛在毒性）進行客觀判定。

總結

在醫療器械的細胞毒性評價中，定量評價（尤其是MTT法）憑借其客觀性、靈敏性和明確的判定標準，是首選的、基礎的評價方法，也是滿足注冊要求的主要依據。定性評價則因其帶有主觀性和快速性的特點，更適合在特定階段用于初步篩查或作為形態學觀察的補充。遵循國家標準GB/T 16886.5的指導，堅持以定量評價為主、必要時輔以定性評價并結合鏡檢的原則，是確保細胞毒性評價結果科學、可靠、合規的關鍵。思途CRO在協助客戶進行醫療器械注冊時，嚴格遵循這一選擇原則進行試驗設計和執行。理解并應用好這一原則，對于保障醫療器械的安全性至關重要。