免疫層析法作為定性體外診斷試劑的主流技術(shù)之一（如膠體金法），通過抗原-抗體特異性結(jié)合實(shí)現(xiàn)快速檢測。精密度研究是評(píng)價(jià)試劑結(jié)果一致性的核心環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到臨床使用的可靠性。根據(jù)國家藥監(jiān)局審評(píng)中心的指導(dǎo)，這類試劑的精密度研究需系統(tǒng)性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，覆蓋可能影響結(jié)果的關(guān)鍵變量，并采用科學(xué)的數(shù)據(jù)分析方法。下面具體展開研究中的關(guān)鍵步驟。

樣本濃度的選擇與設(shè)計(jì)

精密度研究必須包含不同濃度的樣本，尤其是接近臨界值的濃度水平。例如：

- 陰性樣本（不含目標(biāo)物）

- 弱陽性樣本（略高于檢出限）

- 中/強(qiáng)陽性樣本（典型病理濃度）

這種設(shè)計(jì)能驗(yàn)證試劑在不同濃度下的穩(wěn)定性。實(shí)際操作中，建議使用臨床真實(shí)樣本或經(jīng)標(biāo)定的質(zhì)控品，避免人工模擬樣本帶來的偏差。若樣本穩(wěn)定性不足，需分裝凍存并驗(yàn)證凍融影響。

試劑批次與檢測輪次的安排

至少納入3個(gè)不同生產(chǎn)批次的試劑，每批次進(jìn)行多輪重復(fù)檢測（通常≥20次）。重點(diǎn)觀察：

- 同一批次內(nèi)結(jié)果的重復(fù)性

- 不同批次間結(jié)果的一致性

批次差異可能來自原料、包被工藝或生產(chǎn)環(huán)境變化，多輪次測試可暴露潛在波動(dòng)。

時(shí)間與操作者因素的納入

實(shí)驗(yàn)需跨越不同日期（建議≥5天），由多名操作者（≥2人）參與檢測。例如：

- 操作者A在周一、周三檢測

- 操作者B在周二、周四檢測

此舉可評(píng)估人員操作差異、環(huán)境溫濕度變化、設(shè)備校準(zhǔn)狀態(tài)等日常變量對(duì)結(jié)果的影響。

地點(diǎn)差異的驗(yàn)證要求

若試劑擬在多機(jī)構(gòu)使用，需在≥2個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對(duì)研究。各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)：

- 采用統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)方案

- 使用相同型號(hào)設(shè)備

- 獨(dú)立報(bào)告數(shù)據(jù)

通過分析實(shí)驗(yàn)室間差異（如顯色強(qiáng)度偏差），確認(rèn)試劑的跨場地適用性。

數(shù)據(jù)記錄與分析方法

除常規(guī)陰陽性結(jié)果外，必須記錄與標(biāo)準(zhǔn)色卡的比對(duì)標(biāo)值（如L1、L2、L3等級(jí)）：

1. 顯色強(qiáng)度量化：將檢測線顏色與色卡對(duì)照，記錄具體等級(jí)而非主觀描述；

2. 一致性分析：計(jì)算不同條件下L值的變異系數(shù)（CV%），超過15%需排查原因；

3. 臨界樣本重點(diǎn)分析：對(duì)弱陽性樣本，統(tǒng)計(jì)假陰性/假陽性率，確保臨床決策安全。

總結(jié)

對(duì)于以膠體金法等免疫層析法為檢驗(yàn)原理的定性體外診斷試劑，在進(jìn)行精密度研究時(shí)，應(yīng)考慮不同樣本濃度、試劑批次、檢測輪次、時(shí)間、操作者、地點(diǎn)等影響因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。在檢測結(jié)果中，不僅需要提交陰陽性結(jié)果，還應(yīng)提交與標(biāo)準(zhǔn)色卡比對(duì)的數(shù)據(jù)（例如L1、L2、L3……），并對(duì)顯色強(qiáng)度進(jìn)行一致性分析。