在定性檢測試劑臨床試驗里，當你的試驗體外診斷試劑（就是你要注冊的那個新試劑）和用來對比的方法（比如已上市的好試劑或者金標準方法）測出來的結果不一樣了，該怎么辦。這個問題挺關鍵的，直接關系到怎么判斷你的新試劑到底好不好用。

做定性檢測試劑的臨床試驗，核心目的就是看看你這個新試劑測的準不準。怎么判斷準不準呢？通常就是拿它和一個公認靠譜的方法比，這個靠譜的方法就是“對比方法”。但試驗做下來，有時候會發現，同一個樣本，你的新試劑說是陽性，對比方法說是陰性；或者反過來，新試劑說陰性，對比方法說是陽性。這就是檢測結果不一致了。遇到這種情況千萬別慌，也別想著隨便糊弄過去或者直接忽略。國家藥監局的指導原則和官方答疑里都明確說了，必須認真對待這些不一致的結果，有一套規范的處理流程。 思途CRO在項目中就經常要幫客戶處理這類問題。咱得把這些不一致的樣本搞清楚，弄明白會不會影響最終對你新試劑性能的判斷。下面就是具體的處理步驟。

第一步 確認不一致結果

這步很簡單，就是把所有試驗數據拿出來，一個個樣本看。主要看兩種結果：

（1）你的新試劑測出來是陽性，但對比方法測出來是陰性。

（2）你的新試劑測出來是陰性，但對比方法測出來是陽性。

把這些樣本都挑出來，單獨列個清單。記住，這些樣本非常重要，不能隨便扔掉不管。

第二步 綜合分析不一致原因

把這些不一致的樣本挑出來后，不能放著不管，得好好想想為啥會不一樣。可能的原因其實挺多的：

（1）樣本本身的問題：樣本是不是放太久了變質了？采集的時候操作不規范？或者樣本里有什么干擾物質影響檢測？

（2）操作問題：做試驗的人操作失誤了？比如加樣量不準、孵育時間不對、洗板沒洗干凈等等。

（3）試劑問題：你的新試劑本身可能在這個樣本上表現不穩定？或者對比方法（即使是好試劑）也可能偶爾出點小差錯？

（4）臨界值附近：樣本本身的指標濃度正好卡在你設定的陽性判斷值（Cut-off值）附近，這種樣本本身就容易測不準，兩邊結果波動一下就可能不一樣了。

（5）方法學差異：你的新試劑和對比方法用的檢測原理可能不一樣（比如一個用抗體，一個用核酸擴增），針對的目標物也可能有細微差別，這本身就可能導致在某些樣本上結果不同。

好好查查實驗記錄，看看這些樣本當時的檢測情況，操作有沒有問題，儀器狀態怎么樣。這一步分析主要是為了心里有數，看看問題大概出在哪。

第三步 用參考方法或其他方法進行復核分析

光分析原因還不夠，為了更清楚地知道到底誰測對了、誰測錯了，或者這個樣本真實情況到底是什么，需要對這些不一致的樣本進行“復核”。

（1）用什么復核？ 最理想的是找一個更權威、更準確的方法，也就是“臨床參考標準”。比如，診斷某種感染的試劑，可以用病原體分離培養鑒定（如果可行的話）或者公認的核酸檢測金標準方法來做最終判定。如果找不到完美的金標準，也可以用其他被廣泛認可、相對更可靠的方法。

（2）關鍵點：這個復核工作怎么做，用什么方法做復核，必須在你開始做臨床試驗之前，就寫在你的臨床試驗方案里！ 不能等結果出來了再臨時想轍。方案里要寫清楚復核的方法是什么，依據是什么。

（3）復核結果怎么用？ 復核出來的結果很重要，它能告訴你：

a.到底哪個試劑/方法在這個樣本上測對了？

b.這個樣本的真實狀態到底是什么（陽性還是陰性）？

c.幫助你更深入地理解為什么會出現不一致。

但是！請注意一個非常重要的規定：這個復核出來的結果，不能直接混到原來你統計新試劑性能的數據里去！ 比如原來你算靈敏度、特異度、總符合率、Kappa值這些指標，是用新試劑和對比方法直接比較的數據來算的。復核結果不能加進去重新算這些指標。它只能用來單獨分析不一致的原因，以及幫助你判斷不一致結果是否影響整體結論。 這點在《體外診斷試劑臨床試驗指導原則》等文件里反復強調。思途CRO在幫客戶整理報告時對此非常注意。

第四步 評估對產品臨床性能判定的影響

前面幾步都做完了，最后一步也是最關鍵的：綜合看看這些不一致的結果，特別是復核分析的結果，到底會不會影響你對你這個新試劑整體性能的判斷？

（1）不一致樣本多不多？ 如果只是零星幾個樣本不一致，而且復核發現大多是操作失誤或者樣本本身問題，或者兩邊都在臨界值附近波動，那可能對整體性能評價影響不大。

（2）不一致集中在哪？ 是主要集中在某一類樣本上（比如某種疾病、某種樣本類型）？還是分散在各個地方？如果集中在一類，可能說明你的新試劑在這個特定情況下有局限性。

（3）復核結果偏向誰？ 如果復核結果顯示大部分是新的試劑測錯了，那問題就比較嚴重了，說明它的準確性可能達不到要求。如果大部分是對比方法測錯了，那說明你的新試劑可能在某些方面更優，但也得分析清楚原因。

（4）總體性能指標怎么樣？ 最后還是要回頭看整體統計出來的性能指標（靈敏度、特異度、符合率等）是不是達到了你方案里設定的臨床可接受標準？如果達到了，而且不一致樣本有合理解釋，那一般問題不大。如果沒達到，或者不一致樣本數量多且無法合理解釋，那可能就通不過審評了。

在臨床試驗報告里，你必須清清楚楚地寫明白：

（1）總共發現了多少不一致樣本。

（2）對這些樣本做了哪些復核分析（用了什么方法）。

（3）復核的結果大概是什么情況。

（4）你認為這些不一致會不會影響最終判定新試劑的性能，理由是什么。

最后總結一下

在定性檢測試劑臨床試驗里，遇到新試劑和對比方法結果不一致，這事兒很正常，關鍵是要按規矩處理好。核心步驟就四步：先把不一致樣本找出來；然后分析可能的原因；接著用更靠譜的方法（臨床參考標準或其他恰當方法）對這些樣本再做一次，看看到底誰對誰錯，樣本真實情況是啥，這一步的方法必須提前寫在方案里；最后，結合復核結果和整體數據，判斷這些不一致會不會影響最終結論。千萬記住，復核得到的新數據，不能混到原來統計性能的數據里重新計算指標。 把這些步驟做到位了，分析清楚了，才能在報告里給審評老師一個清晰、可靠的交代，說明你的新試劑性能到底如何。 思途CRO在協助客戶進行醫療器械注冊申報時，嚴格遵循這些原則來處理不一致結果。